在臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)工作中,項(xiàng)目校準(zhǔn)是經(jīng)常要做的工作之一,如改變?cè)噭┑姆N類或者批號(hào)。儀器或者檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行過(guò)一次大的預(yù)防性維護(hù)或者更換了重要部件,有可能影響檢測(cè)性能等,必須對(duì)項(xiàng)目進(jìn)行校準(zhǔn)。除此之外,校準(zhǔn)一段時(shí)間后測(cè)定質(zhì)量控制及患者標(biāo)本時(shí)會(huì)出現(xiàn)異常的趨勢(shì)或偏移,采取一般性糾正措施后,仍不能識(shí)別和糾正問(wèn)題時(shí),就必須重新進(jìn)行項(xiàng)目校準(zhǔn),這段時(shí)間即為校準(zhǔn)時(shí)限周期。由于每個(gè)項(xiàng)目的工作原理、試劑來(lái)源以及使用儀器的差異,每個(gè)項(xiàng)目的校準(zhǔn)時(shí)限周期也就不一致。為了解生物化學(xué)常規(guī)項(xiàng)目校準(zhǔn)時(shí)限對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響,筆者進(jìn)行了這方面的研究探討,將結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器:美國(guó)貝克曼公司生產(chǎn)的LX20 全自動(dòng)生物化學(xué)分析儀。

1.1.2 試劑:鉀( K) ISE 法、鈉(Na) ISE 法、氯(Cl) ISE 法、鈣(Ca) ISE 法、磷( P) 鉬酸紫外法、二氧化碳(CO2 ) ISE 法、尿素氮(BUN) 脲酶電極法、肌酐(Cr) 堿性苦味酸法、葡萄糖( GLU) 氧化酶電極法、總蛋白( TP) 雙縮脲法、清蛋白(Alb) 溴甲酚紫法、鎂(Mg) Calmagite 比色法,試劑及校準(zhǔn)品由貝克曼公司提供;總膽紅素( TB) 礬酸鹽氧化法、直接膽紅素(DB) 礬酸鹽氧化法、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AL T) 速率法、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST) 速率法、堿性磷酸酶(AL P) 速率法、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γ-GT) 速率法、淀粉酶(AMY) 法、膽固醇(CHO) 氧化酶法、三酰甘油( TG) CPO-PAP 法、肌酸激酶(CK) 速率法、乳酸脫氫酶(LDH) 速率法、尿酸酶(UA) 比色法,均使用上海東方順宇公司的試劑及校準(zhǔn)品。質(zhì)控為RANDOX 公司生產(chǎn)的復(fù)合非定植臨床化學(xué)控制血清,批號(hào):502UN ,371UE。

1.2 方法:本室所做的常規(guī)生物化學(xué)檢測(cè)項(xiàng)目定標(biāo)校準(zhǔn)后,12 h 為1 周期檢測(cè)1 次質(zhì)量控制血清結(jié)果,重復(fù)測(cè)定4 次,取平均值, 以第1 次測(cè)定均值為靶值, 以相對(duì)偏倚小于1/ 3CL IA′88 的允許誤差為標(biāo)準(zhǔn)建立質(zhì)量控制系統(tǒng)進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)控,若連續(xù)出現(xiàn)超出范圍的偏倚可判定為超出校準(zhǔn)時(shí)限,連續(xù)監(jiān)測(cè)1 個(gè)月,觀察項(xiàng)目定標(biāo)校準(zhǔn)后所檢測(cè)質(zhì)量控制血清檢測(cè)值的變化情況。

2 結(jié)果

24 個(gè)項(xiàng)目在LX20 全自動(dòng)生物化學(xué)分析儀檢測(cè)結(jié)果為:校準(zhǔn)時(shí)限在12 h 的有K、Na 、Cl ; 24 h 的有Ca ; 3 d 的有CO2 、GLU 、BUN、Cr 、P ;1 周的有TP、Alb ;2 周的有Mg、AMY;1 個(gè)月的有TB、DB、ALT、AST、ALP、γ-GT、CHO、TG、CK、LDH、UA ,見(jiàn)表1 。

校準(zhǔn)是一個(gè)測(cè)試和調(diào)整儀器、試劑盒或者檢測(cè)系統(tǒng)以提供反應(yīng)和所測(cè)物質(zhì)之間的已知關(guān)系的過(guò)程。實(shí)驗(yàn)室在進(jìn)行校準(zhǔn)工作時(shí),最重要的是建立合適的校準(zhǔn)方法,包括選擇合適的校準(zhǔn)品,校準(zhǔn)品的數(shù)目、類型和濃度,校準(zhǔn)品應(yīng)盡可能溯源至參考方法和(或) 參考物質(zhì),以及確立校準(zhǔn)的頻度。校準(zhǔn)的頻度是根據(jù)不同項(xiàng)目的校準(zhǔn)時(shí)限周期而定的,不是僅進(jìn)行1 次就可萬(wàn)事無(wú)憂、一勞永逸;也不是無(wú)原則性地、隨隨便便地校準(zhǔn)。選擇最佳校準(zhǔn)時(shí)間,既能節(jié)省檢驗(yàn)工作的時(shí)間和成本,又能保證結(jié)果的準(zhǔn)確性,為臨床提供可靠的數(shù)據(jù)。筆者通過(guò)對(duì)24 項(xiàng)臨床常規(guī)生物化學(xué)檢驗(yàn)項(xiàng)目在一次性定標(biāo)校準(zhǔn)后允許誤差范圍時(shí)限的研究表明,不同項(xiàng)目之間因方法學(xué)、試劑來(lái)源及實(shí)驗(yàn)條件之間的差異造成校準(zhǔn)時(shí)限顯著不同。K、Na 、Cl 在12 h 后即偏離靶值超出允許范圍,Ca 也僅僅延長(zhǎng)了1 倍的時(shí)限。作為電解質(zhì)的項(xiàng)目原本要求就較高,再加上電極本身易波動(dòng),這就要求這些項(xiàng)目最好是12 h 定標(biāo)1 次。同樣是電極法測(cè)定的CO2 項(xiàng)目,因允許偏倚范圍較大,達(dá)( ±10 %) ,因而它可以3 d 校準(zhǔn)1次。GLU 、BUN、Cr 、P 等項(xiàng)目在LX20 全自動(dòng)生物化學(xué)分析儀上均是采用的杯化學(xué)法,其反應(yīng)快,但穩(wěn)定性不如常規(guī)比色法及速率法,校準(zhǔn)時(shí)限不能超過(guò)3 d。TP、Alb 同樣是采用的杯化學(xué)法,但二者穩(wěn)定性較好, 校準(zhǔn)時(shí)限可以延至1 周以上。Mg、TB、DB、ALT、AST、ALP、γ-GT、AMY、CHO、TG、CK、LDH、UA 等生物化學(xué)項(xiàng)目采用的均是常規(guī)比色法或速率法,因LX20 儀器本身穩(wěn)定性是很好的,其校準(zhǔn)時(shí)限主要與試劑有關(guān),除了Mg 和AMY兩種試劑可能存在穩(wěn)定性的問(wèn)題應(yīng)2 周校準(zhǔn)1 次,其余的生物化學(xué)項(xiàng)目定標(biāo)1 次可以保持結(jié)果的準(zhǔn)確性在1 個(gè)月以上,實(shí)際工作中筆者發(fā)現(xiàn)這些項(xiàng)目在同一批內(nèi)的試劑如無(wú)特殊情況基本上僅校準(zhǔn)1 次就足夠了。

本文是以相對(duì)偏倚小于1/ 3 CLIA′88 的允許誤差為推薦值,而不是以t 檢驗(yàn)為判定標(biāo)準(zhǔn)。筆者通過(guò)監(jiān)測(cè)質(zhì)量控制血清結(jié)果發(fā)現(xiàn),24 個(gè)生物化學(xué)常規(guī)項(xiàng)目中,在一段時(shí)間內(nèi)有些經(jīng)t檢驗(yàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的項(xiàng)目,實(shí)際上檢測(cè)結(jié)果并未超出允許誤差范圍,如CO2 、ALP、γ-GT 等,通常此類項(xiàng)目的允許誤差范圍較寬;而有些要求較嚴(yán)的項(xiàng)目,如Na 、Cl 等經(jīng)t 檢驗(yàn)未有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,實(shí)際上檢測(cè)結(jié)果已經(jīng)超出了允許誤差范圍。所以實(shí)際工作中應(yīng)以特定的值為參考,當(dāng)然本文在此推薦的值并不代表合理或理想的測(cè)定允許誤差范圍,僅此作為借鑒。重要的是,每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)自己的特點(diǎn)科學(xué)地定時(shí)進(jìn)行項(xiàng)目校準(zhǔn),建立起合理化的室內(nèi)質(zhì)量控制系統(tǒng),保證全自動(dòng)生物化學(xué)分析儀檢測(cè)所有項(xiàng)目結(jié)果準(zhǔn)確可靠。